細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據(jù)適 pH,Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。
AI的適pH為3~5。AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AI(B-AI)兩種類型。B-AI存在于細胞間隙并結(jié)合在細胞壁上,主要參與韌皮部質(zhì)外體卸載時蔗糖的分解,以維持庫源之間蔗糖的濃度。
測定原理:
B-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與B-AI活性成正比。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取:
按照組織質(zhì)量(g):提取液1體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液1),進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心10min,棄上清,沉淀中加入1mL蒸餾水,充分震蕩混勻,12000g 4℃離心10min,棄上清,沉淀中加入1mL提取液2 充分混勻,4℃浸提過夜,12000g 4℃離心20min,取上清置冰上待測。