編號(hào) |
成分 |
規(guī)格 |
試劑一 |
PCR MagicMix 3.0 |
1 mL(紅蓋) |
試劑二 |
超純水 |
1 mL(亮黃色) |
試劑三 |
阿爾萊特葡萄球菌 PCR 引物混合液 |
100 μL(白蓋) |
試劑四 |
阿爾萊特葡萄球菌 PCR 陽性對(duì)照(1×10E8/μL) |
50 μL(黃蓋) |
試劑五 |
使用手冊(cè) |
1 份 |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
成份 |
N+2 個(gè)樣品管 |
PCR 陰性對(duì)照 |
PCR陽性對(duì)照 |
PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
阿爾萊特葡萄球菌PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
N+2個(gè)樣品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
PCR 陰性對(duì)照(水) |
-- |
18μL |
-- |
PCR 陽性對(duì)照(阿爾萊特葡萄球菌PCR陽性對(duì)照1000倍稀釋液) |
-- |
-- |
18μL |
過程
溫度
時(shí)間
預(yù)變性
95℃
5 min
PCR 反應(yīng)(35 個(gè)循環(huán))
95℃
30 sec
55℃
30 sec
72℃
40 sec
延伸
72℃
7 min
三、電泳檢測(cè):
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。