產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:變形桿菌屬通用PCR試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 產(chǎn)品廠商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價格:2990
  • 產(chǎn)品庫存:100
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
變形桿菌屬通用PCR試劑盒引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增變形桿菌屬通用,與其他病原沒有交叉反應。提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
詳情介紹:
變形桿菌屬通用PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點: 
變形桿菌(Proteus spp.)是人和動物的寄生菌和病原菌,廣泛分布在自然界中,如土壤、水、垃圾、腐敗有機物及人或動物的腸道內(nèi)。變形桿菌一般不致病。夏、秋季節(jié)溫度高,變形桿菌在被污染的食品中大量繁殖,如食用前未徹底加熱,其產(chǎn)生的可引起中毒。進食后 2~30 小時出現(xiàn)上腹部刀絞樣痛和急性腹瀉,伴有惡心、嘔吐、發(fā)熱。病程較短,一般 1~3 天可恢復,很少有死亡。中毒食品主要以動物性食品為主,其次為豆制品和涼拌菜,發(fā)病季節(jié)多在夏、秋,中毒原因為被污染食品在食用前未徹底加熱,變形桿菌食物中毒是我國常見的食物中毒之一。因此快速靈敏檢測變形桿菌具有重要的意義,本試劑盒就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā),它具有下列特點: 
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增變形桿菌屬通用,與其他病原沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分:

編號

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

變形桿菌屬通用 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

變形桿菌屬通用 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
變形桿菌屬通用PCR試劑盒
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 變形桿菌屬通用 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系): 
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

編號

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

變形桿菌屬通用 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

變形桿菌屬通用 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

4. 按下表設置 PCR 反應:

過程

溫度

時間

預變性

95℃

5 min

PCR 反應(35 個循環(huán))

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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