規(guī)格及成分:
編號
成分
規(guī)格
試劑一
PCR MagicMix 3.0
1 mL(紅蓋)
試劑二
超純水
1 mL(亮黃色)
試劑三
檳榔PCR鑒定鑒定引物混合液
100 μL(白蓋)
試劑四
檳榔PCR鑒定鑒定陽性對照(1×10E8 /μL)
50 μL(黃蓋)
試劑五
使用手冊
1 份
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
檳榔PCR鑒定試劑盒
使用方法 :
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加10μL檳榔PCR鑒定鑒定陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:
成份 |
N+2 個樣品管 |
PCR 陰性對照 |
PCR陽性對照 |
PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
檳榔PCR鑒定鑒定引物混合液 |
各 2μL |
2μL |
2μL |
N+2個樣品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
PCR 陰性對照(水) |
-- |
18μL |
-- |
PCR 陽性對照(檳榔PCR鑒定鑒定陽性對照1000倍稀釋液) |
-- |
-- |
18μL |
過程 |
溫度 |
時間 |
預(yù)變性 |
95℃ |
5 min |
PCR 反應(yīng)(35 個循環(huán)) |
95℃ |
30 sec |
55℃ |
30 sec |
|
72℃ |
40 sec |
|
延伸 |
72℃ |
7 min |