產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：非洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào)：50次
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格：2990
  • 產(chǎn)品庫(kù)存：100
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡(jiǎn)單介紹：
非洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增非洲柑桔黃龍病菌，與其他病原沒(méi)有交叉反應(yīng)。提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
詳情介紹：
非洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)： 
非洲柑桔黃龍病菌（Candidatus Liberobacter Africanum）是一種類菌體，柑桔感染黃龍病后，全年均可發(fā)生，一般以夏梢和秋梢發(fā)病多，其次是春梢。新梢的癥狀是葉片表現(xiàn)黃化和黃綠相間的斑駁。在葉片凋落后，枝梢上新長(zhǎng)出的葉片表現(xiàn)缺素狀的花葉。病梢變短、生勢(shì)衰弱，病葉黃厚、變小，且易脫落，形成枯枝。開(kāi)花不適時(shí)，花開(kāi)的多、落得多。果小而畸形，或紅鼻果。后期，根部往往表現(xiàn)為小根腐爛。此菌可以侵染蕓香科柑橘屬和金橘屬植物，引發(fā)癥狀。在田間未見(jiàn)枳發(fā)病，僅枳橙發(fā)病。通過(guò)菟絲子，此菌可以侵染長(zhǎng)春花。在自然界，蕓香科蠔殼刺屬和木蘋(píng)果屬植物可能受此菌侵染，九里香屬植物常見(jiàn)著生大量傳播柑橘黃龍病的柑橘木虱，但其體內(nèi)未見(jiàn)病原菌。，因此非洲柑桔黃龍病菌檢測(cè)具有重要的意義。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開(kāi)發(fā)，它具有下列特點(diǎn)： 
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增非洲柑桔黃龍病菌，與其他病原沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分：

編號(hào)

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL（紅蓋）

試劑二

超純水

1 mL（亮黃色）

試劑三

非洲柑桔黃龍病菌PCR 引物混合液

100 μL（白蓋）

試劑四

非洲柑桔黃龍病菌 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8 /μL）

50 μL（黃蓋）

試劑五

使用手冊(cè)

1 份

運(yùn)輸及保存：
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品 DNA。
非洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒
使用方法：  
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 非洲柑桔黃龍病菌 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）： 
3. 對(duì)N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：

成份

N+2 個(gè)樣品管

PCR 陰性對(duì)照

PCR陽(yáng)性對(duì)照

PCR Magic Mix 3.0

各 20μL

20μL

20μL

非洲柑桔黃龍病菌PCR 引物混合液

各2μL

2μL

2μL

N+2個(gè)樣品DNA模板

各18μL

--

--

PCR 陰性對(duì)照（水）

--

18μL

--

PCR 陽(yáng)性對(duì)照（非洲柑桔黃龍病菌PCR陽(yáng)性對(duì)照1000倍稀釋液）

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過(guò)程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)（35 個(gè)循環(huán)）

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測(cè)：
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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