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產品詳情
  • 產品名稱:非洲綠猴腎細胞;VERO

  • 產品型號:TW-CC9112
  • 產品廠商:通蔚生物
  • 產品價格:800
  • 產品庫存:111
  • 產品文檔:
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簡單介紹:
非洲綠猴腎細胞;VEROVero細胞株是日本千葉大學的YasumuraY和KawakitaY從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細胞常作為轉染宿主,用于支原體的檢測。
詳情介紹:


基本信息

細胞名稱

非洲綠猴腎細胞 ; VERO

細胞品牌

通蔚生物

細胞規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細胞英文

VERO ; Vero ; VeroCCL81 ; Vero 81 ; Vero-81 ; Verda reno

基本形態(tài)

上皮細胞樣

傳代方法

1 : 2傳代

培養(yǎng)條件

氣相 :空氣,95%;CO2,5%  溫度 :37℃

生長特性

貼壁生長

消化時間

3- 4分鐘

凍存條件

無血清細胞凍存液

完全培養(yǎng)基

DMEM(高糖)+10%FBS  VERO完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境

37℃ ; 5%CO2 ; 95%AIR  

供應范圍

僅供科研使用

特征特性

Vero細胞株是日本千葉大學的YasumuraY和KawakitaY從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細胞常作為轉染宿主,用于支原體的檢測。


細胞操作

到貨處理

1、收到細胞后,檢查外包裝情況和箱內是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等問題,請即時聯系。

2、將細胞取出轉移至液氮或-80 度冰箱保存,建議盡早復蘇。

3、復蘇一管如有活性狀態(tài)問題及時與我們聯系,會有技術人員與您溝通指導后再復蘇二管。
特別說明:未與我方聯系擅自復蘇二管出現問題不予售后。

細胞復蘇

1、從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。

2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min。

3、棄上清,沉淀用 5ml 完全培養(yǎng)基重懸,接種 T25 培養(yǎng)瓶,于 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4、隔天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

細胞傳代

1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次。

2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min。

3、棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代(兩個 T25),補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,放入 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞凍存

1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次。

2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min。

3、棄上清,沉淀細胞加入 1ml/支的無血清凍存液,混勻后加入凍存管中。(如:凍一支,加入 1ml 無血清凍存液)

4、將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要將細胞轉入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放 24 小時以上。

T25細胞到貨處理

觀察

1、收到細胞后,請及時核對培養(yǎng)瓶上標注的細胞名稱是否與訂購的細胞名稱一致以及培養(yǎng)瓶是否有破損或漏液等異常情況。

處理

1、75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。
2、顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(40x,100x,200x 各一張)前三天照片為重要售后依據,不提供照片默認收到狀態(tài)良好。

3、不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

4、收到細胞后,及時查看說明書是貼壁細胞還是懸浮細胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細胞的傳代方法操作。

貼壁

未超過 80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留 5ml 完全培養(yǎng)基,放入 37℃、5%CO2 孵箱培養(yǎng);超過 80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。首-次傳代,建議 1:2 傳代兩個 T25,傳代時建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進行對比培養(yǎng)。

細胞注意事項

個別細胞貼壁不牢,在運輸過程中發(fā)生細胞脫落,這是正常現象。

請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm 離心 5min,收集上清(后期對比培養(yǎng)使用),沉淀加入胰酶 1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化 1-2 分鐘后,加 5ml 完全培養(yǎng)基終止反應。再離心,棄上清,加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸。然后按 1:2 比例進行分瓶傳代(兩個 T25),補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,放入37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

注意:如收到密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)


售后服務

細胞予重發(fā)

1. 細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā)。

2. 收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發(fā)。

3. 收到細胞3天內,發(fā)現污染問題,經核實后,重發(fā)。

4. 常溫發(fā)貨細胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發(fā)。

5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現污染經核實后,重發(fā)。

6. 細胞活性問題在收到產品3天內提出真實實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發(fā)。

細胞不予重發(fā)

1. 客戶操作造成細胞污染,不重發(fā)。

2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)

3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。

4. 細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。

5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發(fā)。

6. 收到細胞發(fā)現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)。

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