基本信息
細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
細胞規(guī)格 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細胞英文 |
YAC-1 ; Yac-1 ; YAC |
基本形態(tài) |
淋-巴母細胞樣 |
傳代方法 |
1:2 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% ;溫度:37℃ |
生長特性 |
懸浮生長 |
凍存條件 |
無血清細胞凍存液 |
完全培養(yǎng)基 |
RPMI1640+10%FBS YAC-1完全培養(yǎng)基 |
培養(yǎng)環(huán)境 |
37℃,5%CO2,95%AIR |
供應范圍 |
僅供科研使用 |
細胞特征 |
YAC-1源自Mo-MuLV誘導的A/Sn小鼠淋-巴瘤,細胞對NK細胞的作用敏感,可用于NK細胞活性檢測,鼠痘病毒陰性。 |
注意事項 |
該細胞為懸浮細胞 , 請注意離心收集 , 請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液 |
細胞操作
到貨處理 |
1、收到細胞后,檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等問題,請即時聯(lián)系。 2、將細胞取出轉(zhuǎn)移至液氮或-80 度冰箱保存,建議盡早復蘇。
3、復蘇一管如有活性狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系,會有技術(shù)人員與您溝通指導后再復蘇二管。 |
細胞復蘇 |
1、從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。 2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min。 3、棄上清,沉淀用 5ml 完全培養(yǎng)基重懸,接種 T25 培養(yǎng)瓶,于 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 4、隔天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。 |
細胞傳代 |
1、方法一:收集細胞懸液,至離心管中 1000rpm 離心 5min,棄上清,加 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸,按 1 :2 的比例進行分瓶傳代,補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,放入 37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 2、方法二:可選用半換液方式,將 T25 瓶子豎起來,輕輕拍打兩下,在培養(yǎng)箱靜置 10 分鐘,肉眼可見大部分細胞沉在底部,輕輕吸去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按 1:2 比例分瓶,補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,放入 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 |
細胞凍存 |
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次。 2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min。 3、棄上清,沉淀細胞加入 1ml/支的無血清凍存液,混勻后加入凍存管中。(如:凍一支,加入 1ml 無血清凍存液) 4、將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放 24 小時以上。 |
T25細胞到貨處理 |
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觀察 |
1、收到細胞后,請及時核對培養(yǎng)瓶上標注的細胞名稱是否與訂購的細胞名稱一致以及培養(yǎng)瓶是否有破損或漏液等異常情況。 |
處理 |
1、75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。 3、不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 4、收到細胞后,及時查看說明書是貼壁細胞還是懸浮細胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細胞的傳代方法操作。 |
細胞注意事項 |
1、將 T25 培養(yǎng)瓶中的懸液收集至離心管中 1000rpm 離心 5min,收集上清(后期對比培養(yǎng)使用),加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸,按 1:2比例進行分瓶傳代(兩個 T25),補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,放入 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(傳代時建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進行對比培養(yǎng)。) |
售后服務
細胞予重發(fā) |
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā)。 |
2. 收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。 |
3. 收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
4. 常溫發(fā)貨細胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現(xiàn)污染經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
6. 細胞活性問題在收到產(chǎn)品3天內(nèi)提出真實實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā)。 |
細胞不予重發(fā) |
1. 客戶操作造成細胞污染,不重發(fā)。 |
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。 |
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。 |
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。 |
6. 收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)。 |