產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱： 精液基因組DNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品型號： 200T
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價格：1978
  • 產(chǎn)品庫存：117
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
精液基因組DNA提取試劑盒本試劑盒適用于精液基因組 DNA 的提取。試劑盒采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解體系降解蛋白，結(jié)合硅膠膜特異吸附核酸的原理，可快速純化得到高質(zhì)量的基因組DNA。使用本試劑盒得到的基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染，可直接進(jìn)行PCR、酶切和雜交等相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗。
詳情介紹：
產(chǎn)品及特點(diǎn)
本試劑盒適用于精液基因組 DNA 的提取。試劑盒采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解體系降解蛋白，結(jié)合硅膠膜特異吸附核酸的原理，可快速純化得到高質(zhì)量的基因組DNA。使用本試劑盒得到的基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染，可直接進(jìn)行PCR、酶切和雜交等相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗。

它具有下列特點(diǎn)：
1. 簡便快速，可快速獲得高純度的基因組 DNA；
2. 重復(fù)性好，產(chǎn)量高；
3. 完全去除污染物和抑制劑，便于下游應(yīng)用。


成分規(guī)格

Buffer GL

12ml

25ml

50ml

Buffer GTL

12ml

25ml

50ml

Buffer W1（concentrate）

13ml

26ml

52ml

Buffer W2（concentrate）

15ml

30ml

60ml

Buffer EB

10ml

10ml

30ml

Proteinase K

1ml

2×1ml

4×1ml

Spin Column with Collection Tubes

50套

100套

200套

蛋白酶 K 于-20℃　，其他組分室溫（15 - 25℃），可保存12 個月

本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于其它用途


使用方法
自備試劑
DTT、無水乙醇、RNase A（可選）。
（注 意：Buffer W1 和 Buffer W2 為濃縮液，按要求加入無水乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發(fā)）
1. 吸取 50-100ul 新鮮或冷凍精液，加入200 ul Buffer GTL，再加入1MDTT30 ul混勻。
2. 加入 20 ul Proteinase K 溶液，充分混勻，在 56℃放置，直至組織完全溶解。
3. 加入 200 ul Buffer GL，充分混勻，70℃水浴或金屬浴處理10 min，期間每隔一段時間震蕩離心管，溶液變得清亮后短暫離心，以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
（注 意：Buffer GL 加入時可能會產(chǎn)生白色沉淀，一般70℃時會消失，不影響后續(xù)實(shí)驗，如溶液未變清亮，說明細(xì)胞裂解不徹底，可能導(dǎo)致提取的DNA量少或者提取的DNA不純）
4. 加入 200 ul 無水乙醇，充分震蕩，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁水珠。
5. 將所得溶液和絮狀沉淀轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中的濾液。
6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 ul Buffer W1，室溫12,000 rpm離心30 sec，棄收集管中濾液。

（注 意：Buffer W1 為濃縮液，按要求加入無水乙醇，用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發(fā)）

7. 向吸附柱內(nèi)加入 600 ul Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。
（注 意：Buffer W2 為濃縮液，按要求加入無水乙醇，用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發(fā)）

8. 向吸附柱內(nèi)加入 500 ul Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心2min，棄收集管中濾液。

9. 將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 塑料離心管（自備）中，加入50 - 100 ul Buffer EB，室溫放置 2 min。10,000 rpm 離心 1 min，離心管底溶液即基因組DNA。

（注 意：為增加洗脫效率，可將洗脫液在 60℃預(yù)熱。如需使用去離子水洗脫，可用NaOH調(diào)整其pH值在 7.0 - 8.5 之間，為了增加基因組 DNA 回收率，可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置2 min，再次離心收集）

注意事項
1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 產(chǎn)生沉淀，可在 56℃水浴溶解。
２. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致提取的 DNA 片段小，提取量下降。
３. 所有離心步驟均為臺式離心機(jī)，室溫下操作。
4. 按要求在 Buffer W1/W2 中加入無水乙醇。
精液基因組DNA提取試劑盒

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