標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液操作方法很關(guān)鍵

標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液操作方法很關(guān)鍵

[包裝規(guī)格]：10ml×8支/盒,根據(jù)血紅蛋白濃度不同，而將氰化高鐵血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液分別為50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L及200gHb/L

標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液操作方
1.光電比色計標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制法:
1.1標(biāo)準(zhǔn)液每套四支,其濃度分別為50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L、200gHb/L
1.2用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管，在540nm波長處用分光光度計或綠色濾光片的光電比色計進(jìn)行測量，調(diào)吸光度（A值）為“0”，再測量標(biāo)準(zhǔn)液管，每管測量3次吸光度（A值），取均值?？v坐標(biāo)為吸光度（A值），橫坐標(biāo)為Hb克數(shù)（g Hb/L血液），在標(biāo)準(zhǔn)計算紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.3用標(biāo)定過的吸管準(zhǔn)確吸取20μl血液，放入盛有5ml文齊氏液的試管中吸洗三次混勻（251倍稀釋），5分鐘后在同一比色計上測定血樣品管的吸光度值（A值），從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出A值相對應(yīng)血樣品的血紅蛋白克數(shù)（g Hb/L）。
2. 血紅蛋白計的校正法:
2.1 用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管，將血紅蛋白計的讀數(shù)調(diào)為“0”值。
2.2 取出空白管，換上單濃度血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)管（100gHb/L、130gHb/L、
150gHb/L），旋轉(zhuǎn)按鈕使血紅蛋白計的讀數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)管克數(shù)一致。按1.3項方法制備血樣品管并混勻，5分鐘后在同一血紅蛋白計上測定，顯示克數(shù)為該血樣品的實際克數(shù)（g Hb/L）。

組成結(jié)構(gòu)人體內(nèi)的血紅蛋白由四個亞基構(gòu)成，分別為兩個α亞基和兩個β亞基，在與人體環(huán)境相似的電解質(zhì)溶液中血紅蛋白的四個亞基可以自動組裝成α2β2的形態(tài)。血紅蛋白的每個亞基由一條肽鏈和一個血紅素分子構(gòu)成，肽鏈在生理條件下會盤繞折疊成球形，把血紅素分子抱在里面，這條肽鏈盤繞成的球形結(jié)構(gòu)又被稱為珠蛋白。血紅素分子是一個具有卟啉結(jié)構(gòu)的小分子，在卟啉分子中心，由卟啉中四個吡咯環(huán)上的氮原子與一個亞鐵離子配位結(jié)合，珠蛋白肽鏈中第8位的一個組氨酸殘基中的吲哚側(cè)鏈上的氮原子從卟啉分子平面的上方與亞鐵離子配位結(jié)合，當(dāng)血紅蛋白不與氧結(jié)合的時候，有一個水分子從卟啉環(huán)下方與亞鐵離子配位結(jié)合，而當(dāng)血紅蛋白載氧的時候，就由氧分子頂替水的位置。