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介紹ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟

日期：2024-12-22 11:01
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摘要：在實(shí)驗(yàn)的過程中，會(huì)遇到很多不一樣的問題，比如剛開始不知道什么樣的ELISA試劑盒好，該選擇什么樣的ELISA試劑盒來做實(shí)驗(yàn)，還有ELISA試劑盒做實(shí)驗(yàn)可以稀釋血清嗎？今天就介紹一下為什么ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)要稀釋血清。 在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋？有兩個(gè)原因： 1、競(jìng)爭(zhēng)抑制比較明顯，應(yīng)稀釋競(jìng)爭(zhēng)物； 2、血清中含有的性腺比較低，應(yīng)該濃縮才對(duì)。 ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟： 先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后，加底物溶液顯色，終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求＜0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。

在實(shí)驗(yàn)的過程中，會(huì)遇到很多不一樣的問題，比如剛開始不知道什么樣的ELISA試劑盒好，該選擇什么樣的ELISA試劑盒來做實(shí)驗(yàn)，還有ELISA試劑盒做實(shí)驗(yàn)可以稀釋血清嗎？今天就介紹一下為什么ELISA實(shí)驗(yàn)要稀釋血清。

在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋？有兩個(gè)原因：
1、競(jìng)爭(zhēng)抑制比較明顯，應(yīng)稀釋競(jìng)爭(zhēng)物；
2、血清中含有的性腺比較低，應(yīng)該濃縮才對(duì)。

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟：
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后，加底物溶液顯色，終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求＜0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。 

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