怎樣選擇合適的二抗

當(dāng)你徘徊在如何選擇二抗，或不知怎樣選擇合適的二抗時(shí)，你的眼神告訴我，你糾結(jié)了，下面，小編詳細(xì)介紹一下怎樣選擇合適的二抗。

二抗是能和抗體結(jié)合，即抗體的抗體，其主要作用是檢測(cè)抗體的存在，放大一抗的信號(hào)。二抗是利用抗體是大分子的蛋白質(zhì)具有抗原性的性質(zhì)，去免疫異種動(dòng)物，由異種動(dòng)物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的針對(duì)于此抗體的免疫球蛋白。用抗AIV H5亞型血凝素單克隆抗體為包被抗體,兔抗AIV IgG為二抗。

1. 弄清一抗的宿主物種是什么

二抗指向一抗的物種。如果使用來源于兔的一抗，則需要來源于除兔以外的其它物種的抗兔二抗。

2. 了解一抗蛋白類型

二抗必須指向一抗同型。

3. 需要酶學(xué)或熒光檢測(cè)嗎？

偶聯(lián)類型是依賴于應(yīng)用的。

4. 有必要使用 F(ab) 或 F(ab＇)2片段抗體嗎？

F(ab) ) 和 F(ab＇)2片段抗體消除了抗體 Fc 部分與細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞、 中性粒細(xì)胞、NK 細(xì)胞和 B 細(xì)胞）上 Fc 受體之間的非特異性結(jié)合，并且由于它們尺寸較小而能夠更有效地滲透組織。

5. 是否需要親和純化的抗體或 IgG 片段？

使用親和純化的抗體或 IgG 片段的優(yōu)點(diǎn)將取決于預(yù)期的結(jié)合類型。

6. 是否需要預(yù)吸附的二抗？

對(duì)于富含免疫球蛋白的組織和細(xì)胞，通常推薦使用預(yù)吸附血清的二抗于蛋白質(zhì)印 跡應(yīng)用。

7. 是否需要抗 IgG 重鏈和輕鏈、抗輕鏈或抗 F(ab＇)2 二抗？

抗 IgG 重鏈和輕鏈的抗體同時(shí)與 IgG 亞類的重鏈和輕鏈反應(yīng)抗輕鏈抗體與在所有免疫球蛋白類中均相同的一抗輕鏈反應(yīng)抗 F(ab＇)2 二抗與一抗的 F(ab＇)2 部分反應(yīng)。

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