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如何避免ELISA實驗中基質(zhì)效應(yīng)
日期：2024-12-22 03:37
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摘要：什么是基質(zhì)效應(yīng)呢？
首先我們要知道什么是基質(zhì)，基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會對分析過程有顯著干擾，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是ELISA試劑盒開發(fā)和使用中需要避開的雷。
如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢？
當(dāng)單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是實驗操作出現(xiàn)問題，這時應(yīng)增加重復(fù)，進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時，應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響，建立校正曲線予以修改。
基質(zhì)效應(yīng)的原因錯綜復(fù)雜，有可能是樣品中存在的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導(dǎo)致樣本值無法計算出數(shù)值，或許數(shù)值為負(fù)。
那我們?nèi)绾伪苊釫LISA實驗中基質(zhì)效應(yīng)？
基質(zhì)效應(yīng)可以通過產(chǎn)品研發(fā)階段的優(yōu)化盡可能去消除的。通蔚生物針對ELISA產(chǎn)品研發(fā)進(jìn)行了多種優(yōu)化。ELISA試劑盒在開發(fā)進(jìn)程中，標(biāo)準(zhǔn)品不選用人或動物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液，只能選用其仿照物。
什么是基質(zhì)效應(yīng)呢？
首先我們要知道什么是基質(zhì)，基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會對分析過程有顯著干擾，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是ELISA試劑盒開發(fā)和使用中需要避開的雷。
如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢？
當(dāng)單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是實驗操作出現(xiàn)問題，這時應(yīng)增加重復(fù)，進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時，應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響，建立校正曲線予以修改。
基質(zhì)效應(yīng)的原因錯綜復(fù)雜，有可能是樣品中存在的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導(dǎo)致樣本值無法計算出數(shù)值，或許數(shù)值為負(fù)。
那我們?nèi)绾伪苊釫LISA實驗中基質(zhì)效應(yīng)？
基質(zhì)效應(yīng)可以通過產(chǎn)品研發(fā)階段的優(yōu)化盡可能去消除的。通蔚生物針對ELISA產(chǎn)品研發(fā)進(jìn)行了多種優(yōu)化。ELISA試劑盒在開發(fā)進(jìn)程中，標(biāo)準(zhǔn)品不選用人或動物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液，只能選用其仿照物。
我們量身定制的緩沖液系統(tǒng)，這些優(yōu)化后的緩沖液體系能很好消除基質(zhì)效應(yīng)。還有當(dāng)檢測某個分析物時，其他相關(guān)因子或類似結(jié)構(gòu)因子如果有非特異性結(jié)合，也會導(dǎo)致基質(zhì)效應(yīng)，我們也因此做了大量的交叉反應(yīng)，確保沒有明顯的交叉反應(yīng)和干擾。
而且我們試劑盒必須通過嚴(yán)格的基質(zhì)效應(yīng)測試，全部包括線性稀釋和摻入回收率實驗，并把測試結(jié)果記錄在說明書中。