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如何挑選合適的試劑盒之特性區(qū)別

日期:2024-12-22 03:37
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摘要:1. 根據(jù)樣品檢測(cè)物水平來(lái)選擇 如果實(shí)驗(yàn)君對(duì)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù),選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過(guò)試劑盒的檢測(cè)范圍(標(biāo)曲范圍), 也需做適當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋。在計(jì)算結(jié)果時(shí),需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 2. 根據(jù)樣本可獲得性來(lái)選擇 通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應(yīng)商的試劑盒對(duì)樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認(rèn)真考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測(cè)時(shí)更需謹(jǐn)慎。

根據(jù)不同的特性選擇所需要的試劑盒

1. 根據(jù)樣品檢測(cè)物水平來(lái)選擇

如果實(shí)驗(yàn)君對(duì)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù),選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過(guò)試劑盒的檢測(cè)范圍(標(biāo)曲范圍), 也需做適當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋。在計(jì)算結(jié)果時(shí),需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
2. 根據(jù)樣本可獲得性來(lái)選擇
通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應(yīng)商的試劑盒對(duì)樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認(rèn)真考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測(cè)時(shí)更需謹(jǐn)慎。
3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇
如果實(shí)驗(yàn)君的實(shí)驗(yàn)樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個(gè)合適的試劑盒相對(duì)容易,但如果您的實(shí)驗(yàn)樣品來(lái)源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬(wàn)種試劑盒,覆蓋多物種的供應(yīng)商。但如果又非要檢測(cè)這些物種的指標(biāo)時(shí),要對(duì)待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。對(duì)于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過(guò)血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的驗(yàn)證。在選擇試劑盒時(shí),要詳細(xì)閱讀說(shuō)明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會(huì)存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因此需根據(jù)樣品來(lái)選擇試劑盒,必要時(shí)還要根據(jù)樣本來(lái)適當(dāng)優(yōu)化?;蛟跇悠肥占埃乳喿x一些可靠供應(yīng)商試劑盒的說(shuō)明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細(xì)胞裂解物,則需要更謹(jǐn)慎的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒(méi)有經(jīng)過(guò)多種來(lái)源組織樣本的驗(yàn)證。這需要實(shí)驗(yàn)君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對(duì),都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。