ELISA試劑盒樣本的處理方式及保存注意事項

ELISA試劑盒樣本的處理方式：
1、組織提取液、肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmpx5min，取上清，-20C或4°C保存?zhèn)溆?
2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，胃液、唾液一般采集時間是空腹采集，一般隔夜尿不采集;
3、采集血清時，一股要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4C靜置半小時后，800-1000rmpx5min分離，取上清，-20C或4C保存?zhèn)溆?
4、采集血漿時一般不加抗凝劑，采集后立即離心800-1000rmpx5min分離，取上清，-20°C或4C保存?zhèn)溆?
5、不貼壁細胞(分泌性蛋白)，將培養(yǎng)基和細胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmpx10min，吸取上清至另一10ml離心管中，10000rmpx10min，-20C或4°C保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理。
ELISA試劑盒保存注意事項：
1、要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以RP為標記酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
2、樣本的采集及血消分離中要注意盡里避免污染，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些內(nèi)源性酶如大腸桿菌的-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
3、血清標本如是以無菌操作分離，則可以在2~8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70C以下。
4、冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融標本的混勻亦應(yīng)注意，不要進行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可。
5、標本在保存中如出現(xiàn)污染所致的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。