通蔚生物大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞;C6到貨處理及培養(yǎng)操作

通蔚生物大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞;C6到貨處理及培養(yǎng)操作
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞;C6膠質(zhì)細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質(zhì)瘤克隆，經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。當細胞從低密度生長到滿瓶時，S-100產(chǎn)量增加10倍。
詳情介紹：
基本信息
細胞名稱
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 ; C6
細胞品牌
通蔚生物
細胞規(guī)格
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞英文
C6 ; C-6 ; C 6 ; RGC-6 ; RGC6 ; RGc6
基本形態(tài)
上皮細胞樣
傳代方法
1 : 2傳代
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2,5% ；溫度：37℃
生長特性
貼壁生長
消化時間
1 : 2分鐘
凍存條件
無血清細胞凍存液
完全培養(yǎng)基
F12K培養(yǎng)基(SIGMA,添加NaHCO3 2.5g/L)，82.5%；馬血清，15%；優(yōu)-質(zhì)胎牛血清，2.5%。C6完全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境
37℃，5%CO2，95%AIR
供應(yīng)范圍
僅供科研使用
注意事項
每傳10代左右，用嘌呤霉素(4ug/ml)鞏固一下
特征特性
膠質(zhì)細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質(zhì)瘤克隆，經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。當細胞從低密度生長到滿瓶時，S-100產(chǎn)量增加10倍。
細胞操作
到貨處理
1、收到細胞后，檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等問題，請即時聯(lián)系。
2、將細胞取出轉(zhuǎn)移至液氮或－80 度冰箱保存，建議盡早復蘇。
3、復蘇一管如有活性狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系，會有技術(shù)人員與您溝通指導后再復蘇二管。
特別說明：未與我方聯(lián)系擅自復蘇二管出現(xiàn)問題不予售后。
細胞復蘇
1、從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁。
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀用 5ml 完全培養(yǎng)基重懸，接種 T25 培養(yǎng)瓶，于 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、隔天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞傳代
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細胞一次。
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀細胞用 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進行分瓶傳代（兩個 T25），補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶，放入 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞凍存
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細胞一次。
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入 5ml 完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min。
3、棄上清，沉淀細胞加入 1ml/支的無血清凍存液，混勻后加入凍存管中。（如：凍一支，加入 1ml 無血清凍存液）
4、將凍存細胞直接放入－80℃冰箱即可；如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，需在-80℃冰箱存放 24 小時以上。
T25細胞到貨處理
觀察

1、收到細胞后，請及時核對培養(yǎng)瓶上標注的細胞名稱是否與訂購的細胞名稱一致以及培養(yǎng)瓶是否有破損或漏液等異常情況。
處理
1、75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。
2、顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40x,100x,200x 各一張）前三天照片為重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好。
3、不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
4、收到細胞后，及時查看說明書是貼壁細胞還是懸浮細胞形態(tài)，并按常規(guī)貼壁或懸浮細胞的傳代方法操作。
貼壁
未超過 80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留 5ml 完全培養(yǎng)基，放入 37℃、5%CO2 孵箱培養(yǎng)；超過 80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。首-次傳代，建議 1:2 傳代兩個 T25，傳代時建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基，進行對比培養(yǎng)。
細胞注意事項
個別細胞貼壁不牢，在運輸過程中發(fā)生細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。
請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm 離心 5min，收集上清（后期對比培養(yǎng)使用），沉淀加入胰酶 1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化 1-2 分鐘后，加 5ml 完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸。然后按 1:2 比例進行分瓶傳代（兩個 T25），補充新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶，放入37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（注意：如收到密封培養(yǎng)瓶，處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)
售后服務(wù)
細胞予重發(fā)
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)。
2. 收到細胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。
3. 收到細胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)。
4. 常溫發(fā)貨細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后，絕大多數(shù)細胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)。
5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后，出現(xiàn)污染經(jīng)核實后，重發(fā)。
6. 細胞活性問題在收到產(chǎn)品3天內(nèi)提出真實實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)。
細胞不予重發(fā)
1. 客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)。
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
4. 細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。
6. 收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。
上海通蔚生物以誠信為本，努力打造的品牌，為您提供的大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞;C6售中、售前、售后服務(wù)，具有的技術(shù)團隊，把產(chǎn)品引入國內(nèi)市場，滿足國內(nèi)廣大客戶的需求，在二十一世紀生命科學蓬勃發(fā)展的時代，將緊跟生命科學的發(fā)展動態(tài)，為廣大科研學者探索生命的奧秘而奉獻綿薄之力！