1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
編號(hào)
成分
規(guī)格
試劑一
PCR MagicMix 3.0
1 mL(紅蓋)
試劑二
超純水
1 mL(亮黃色)
試劑三
石斛PCR鑒定引物混合液
100 μL(白蓋)
試劑四
石斛PCR鑒定陽性對(duì)照(1×10E8/μL)
50 μL(黃蓋)
試劑五
使用手冊(cè)
1 份
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
石斛PCR鑒定試劑盒
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。2. 如果有N個(gè)樣品,則需要做N+2個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加10μL石斛PCR鑒定陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系):
3. 對(duì)N+2個(gè)樣品,在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照,故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分:
成份 |
N+2 個(gè)樣品管 |
PCR 陰性對(duì)照 |
PCR陽性對(duì)照 |
||
PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
||
石斛PCR鑒定引物混合液 |
各 2μL |
2μL |
2μL |
||
N+2個(gè)樣品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
||
PCR 陰性對(duì)照(水) |
-- |
18μL |
-- |
||
PCR 陽性對(duì)照(石斛PCR鑒定陽性對(duì)照1000倍稀釋液) |
-- |
-- |
18μL |
過程 |
溫度 |
時(shí)間 |
預(yù)變性 |
95℃ |
5 min |
PCR 反應(yīng)(35 個(gè)循環(huán)) |
95℃ |
30 sec |
55℃ |
30 sec |
|
72℃ |
40 sec |
|
延伸 |
72℃ |
7 min |