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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒?

  • 產(chǎn)品型號(hào):50次
  • 產(chǎn)品廠商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格:2990
  • 產(chǎn)品庫存:100
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒?引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增絲狀支原體絲狀亞種SC型,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
詳情介紹:
絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn): 
絲狀支原體絲狀亞種 SC 型(Mycoplasma mycoides subsp mycoidesSC)只感染牛屬反芻動(dòng)物,即主要是牛、瘤牛和牦牛,會(huì)引起牛傳染性胸膜肺炎,是一種高度接觸性傳染病,以滲出性纖維素性肺炎和漿液纖維素性胸膜肺炎為特征。初期病變以小葉性支氣管肺炎為特征。肺炎灶充血、水腫,呈鮮紅色或紫紅色。中期呈漿液性纖維素性胸膜肺炎,病肺腫大、增重,灰白色,多為一側(cè)性,以右側(cè)較多,多發(fā)生在膈葉,也有在心葉或尖葉者。該往往會(huì)給養(yǎng)殖業(yè)帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失,因此絲狀支原體絲狀亞種 SC 型的檢測具有重要的意義。本試劑盒是根據(jù) PCR 原理開發(fā),它具有下列特點(diǎn): 
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增絲狀支原體絲狀亞種SC型,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分:

編號(hào)

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

絲狀支原體絲狀亞種SC型 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

絲狀支原體絲狀亞種SC型 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR試劑盒
自備試劑:

樣品 DNA。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品,則需要做N+2個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 絲狀支原體絲狀亞種SC型 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系): 
3. 對N+2個(gè)樣品,在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽性對照和一個(gè)PCR陰性對照,故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分:

成份

N+2 個(gè)樣品管

PCR 陰性對照

PCR陽性對照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

絲狀支原體絲狀亞種SC型PCR引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個(gè)樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR 陰性對照(水)

--

18μL

--

PCR 陽性對照(絲狀支原體絲狀亞種

SC型PCR陽性對照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):

過程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)(35 個(gè)循環(huán))

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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