產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱： Multiplex PCR Kit

  • 產(chǎn)品型號： 100次×20ul
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價格：460
  • 產(chǎn)品庫存：116
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
Multiplex PCR Kit多重 PCR 是指在單個 PCR 反應(yīng)中同時對多個基因座位進(jìn)行擴(kuò)增的PCR技術(shù)，操作步驟和普通 PCR 相同，但可同時檢測多個片段，在科學(xué)研究和疾-病診斷等多個領(lǐng)域有重要意義。本試劑盒含有多重 PCR 專用熱啟動 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase，具有極高的擴(kuò)增特異性和靈敏度。配合針對多重 PCR 反應(yīng)深度優(yōu)化的專用緩沖液5×Multiplex Buffer，特別適用于微量樣本的多位點檢測。
詳情介紹：

產(chǎn)品特點
多重 PCR 是指在單個 PCR 反應(yīng)中同時對多個基因座位進(jìn)行擴(kuò)增的PCR技術(shù)，操作步驟和普通 PCR 相同，但可同時檢測多個片段，在科學(xué)研究和疾-病診斷等多個領(lǐng)域有重要意義。本試劑盒含有多重 PCR 專用熱啟動 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase，具有極高的擴(kuò)增特異性和靈敏度。配合針對多重 PCR 反應(yīng)深度優(yōu)化的專用緩沖液5×Multiplex Buffer，特別適用于微量樣本的多位點檢測。

它具有以下特點：
1. 適用范圍廣，可以高效地完成絕大多數(shù)多重 PCR 檢測；
2. 擴(kuò)增穩(wěn)定，可以大程度地減少反應(yīng)體系優(yōu)化步驟；
3. 擴(kuò)增緩沖高度優(yōu)化，較大程度上抑制非特異性擴(kuò)增。
4. 單獨的鎂離子成分，可根據(jù)實驗需求自行調(diào)整。

成份規(guī)格

產(chǎn)品組成

規(guī)格

5×Multiplex Buffer（無 MgCl2）

210μl / 420μl

Multiplex DNA Polymerase

60μl / 110μl

dNTP（10mM）

30μl /60μl

MgCl2（25mM）

60μl / 120μl

-20℃保存一年

本產(chǎn)品僅供科研使用 ，不得用于其它用途


使用方法
（注 意：以下舉例推薦PCR體系和反應(yīng)條件，實際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整和優(yōu)化）
1.PCR體系推薦反應(yīng)體系（20μl）

試劑

用量

模板 DNA

< 1μg

Primer mix (10 μM each)

0.5μl

5×Multiplex Buffe（無MgCl2）

4μl

Multiplex DNA Polymerase

1μl

MgCl2（25mM）

 1μl

dNTP（10mM）

0.5μl

ddH2O

Up to 20μl


注 意：
推薦引物反應(yīng)終濃度為每條引物 0.1 μM，可在 0.05 - 0.4 μM 之間調(diào)整。MgCl2終濃度可在 1.0 - 4.0 mM之間調(diào)整。
2. PCR 反應(yīng)程序

過程

溫度

時間

預(yù)變性

95℃

5min

25－35cycles

變性

95℃

30sec

退火

60℃

30sec

延伸

72℃

60sec/kb

后延伸

72℃

5min


注意：
A. 多數(shù)情況下，使用默認(rèn)退火溫度即可。如擴(kuò)增效果不佳，可通過設(shè)置退火溫度梯度實驗來摸索適退火溫度。
B. 預(yù)變性時間為 5 min，用于充分釋放酶活。請勿降低溫度或縮短時間。
C. 對于低拷貝模板、長片段或者擴(kuò)增片段較多的情況，可延長退火時間至 3 min 以提高擴(kuò)增效率。
D. 延伸時間以長片段為準(zhǔn)設(shè)定。適度延長延伸時間有助于提高擴(kuò)增產(chǎn)量且有利于困難模板擴(kuò)增。延伸時間過長可能會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增增多。
E. 擴(kuò)增微量樣本時，可通過增加循環(huán)數(shù)提高擴(kuò)增產(chǎn)物量。循環(huán)數(shù)過多可能會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增增多。
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