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ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)怎樣避免氣泡
日期：2024-12-22 22:45
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摘要：在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的時(shí)候有氣泡我們?cè)撛趺崔k？又該如何避免氣泡？
通常ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。很多說(shuō)明書、教科書上也都提到，加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡，這到底是什么原因呢？因?yàn)樵谧鰧?shí)驗(yàn)的過(guò)程中，有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產(chǎn)生氣泡，是不是這樣對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)后什么影響？
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使
2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。
3.包被時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不完全實(shí)際包被量下降－－弱陽(yáng)性甚至假陰性。
4.封閉時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在，引起非特異性結(jié)合－－本底增高，假陽(yáng)性。
5.加樣時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合－－弱陽(yáng)性甚至假陰性。
6.加二抗時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合－－弱陽(yáng)性甚至假陰性（競(jìng)爭(zhēng)法相反－－－－假陽(yáng)性）。
7.加顯色液時(shí)有氣泡的話－－－顯色不完全。
8.加終止液時(shí)有氣泡的話（1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色，OD值增高）
9.洗滌時(shí)有氣泡的話，非特異性結(jié)合物不能完全洗去，做無(wú)用功。
避免方法：
1.加樣時(shí)盡量靠近孔底（不要接觸孔底），用力均勻，不要過(guò)快過(guò)猛。
2.封閉時(shí)一定要加滿孔，
3.洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要），氣泡會(huì)浮上來(lái)會(huì)驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。
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